Способы получения хроматограмм

Зависимо от метода получения хроматограмм различают внутренние и наружные хроматограммы. В случае внутренней хроматограммы разделяемые составляющие пробы проходят различное расстояние за однообразное время. После разделения все они еще находятся на недвижной фазе и там же детектируются. Этот вид хроматограмм типичен для плоскостных вариантов, таких, как картонная либо тонкослойная хроматография. Недвижная фаза размещена Способы получения хроматограмм на пластинке, а подвижная движется через недвижную за счет капиллярных сил либо под воздействием гравитации. )т.е. рассредотачивание разделяемых веществ в виде отдельных полос (зон) повдоль колонки представляет собой внутреннюю хроматография (см. рис. а).

Наружные хроматограммы получают в колоночной хроматографии— в газовой, высокоэффективной жидкостной либо флюидной хроматографии. В данном Способы получения хроматограмм случае все составляющие проходят однообразный путь по колонке, и благодаря специфичным взаимодействиям с недвижной фазой они через различное время выходят из колонки и потом могут быть детектированы. Графическое изображение ( нередко получаемое при помощи самописца либо ЭВМ) рассредотачивания веществ в элюата именуют наружной хроматограммой, либо просто хроматограммой. (см. рис. б Способы получения хроматограмм).

Существует три вида хроматографии, различающихся методом проведения опыта и предназначением: элюентная (либо проявительная), передная и вытеснительная.

Элюентная ионообменная хроматография

Разглядим методику этого вида хроматографии на примере разделения консистенции Cl-, Br- и I- - ионов с внедрением сильноосновного анионита в NO3- -форме. Тогда в качестве элюента следует использовать раствор NaNO Способы получения хроматограмм3. В высшую часть колонки вводят маленькой объем пробы, содержащей NaCl, NaBr и NaI, растворенных в элюенте. Потом через колонку пропускают элюент. Вытекающий из колонки элюат анализируют на содержание Cl-, Br- и I- - ионов.

На рис. 9 приведена хроматограмма разделения консистенции обозначенных ионов. Необходимо подчеркнуть, что в итоге хроматографирования составляющие Способы получения хроматограмм консистенции были получены не в виде личных веществ, а в виде консистенции с нитратом натрия. Необходимость конфигурации концентрации элюента в процессе хроматографирования (градиентное элюирование) разъясняется последующими обстоятельствами. Если использовать только 2 М раствор NaNO3 (изократическое элюировние), тогда хроматографические пики хлорид- и бромид- ионов будут перекрываться и разделение будет неполным. Применение Способы получения хроматограмм только 0,5 М раствора NaNO3 сдвигает хроматографическую полосу иодида на право и значительно размывает её, что затрудняет определение низких концентраций иодид-ионов.

Рис. 1. . Выходные кривые элюирования галогенид-ионов.

Передная ионообменная хроматография

Первым шагом проведения опыта в данном виде хроматографии является перевод ионита в форму того иона, у которого сорбционная способность выражена в наименьшей степени Способы получения хроматограмм, чем у хоть какого из ионов консистенции, подлежащей разделению. Потом через колонку пропускают раствор пробы. В колонку не подают никаких других смесей, не считая раствора разделяемой консистенции. В отличие от элюентной хроматографии тут проба поступает безпрерывно.

На рис. 10 приведена хроматограмма переднего разделения консистенции хлорид-, бромид- и иодид Способы получения хроматограмм- ионов на анионите в ацетатной форме. Потому что коэффициент рассредотачивания ацетат- ионов меньше, чем хоть какого из галогенид-ионов, он вытесняется из фазы ионита и его фронт продвигается по колонке, опережая хроматографические зоны Cl-, Br-, и I-. Практически все ацетат- ионы вытесняться из колонки, до того как в элюате появится какой Способы получения хроматограмм-нибудь галогенид- ион. Прямо за ацетат- ионами по колонке перемещается фронт хлорид- ионов как менее сорбируемых по сопоставлению с бромидом и иодидом. Сейчас хлорид – ионы делают функцию вытеснителя. Потому концентрация бромид – ионов в элюате стремительно возрастает, в то время как содержание хлорида миниатюризируется. По истечении некого промежутка времени Способы получения хроматограмм Cl- и Br- - ионы выходят из колонки сразу. Отныне обозначенную смесь ионов теснят иодид- ионы. Сначала содержание иодида в элюате растет, а потом выходит на "плато" и в последних порциях элюента присутствую все три галогенид – иона. Стоит отметить, что общая концентрация электролитов в элюате равна сумме начальных концентраций Способы получения хроматограмм галогенид- ионов в хроматографируемом растворе пробы. Потому в итоге элюат будет иметь тот же состав, что и анализируемый раствор.

Рис. 2. Выходные кривые для галогенид-ионов, приобретенные способом передней хроматографии.

Способ передней хроматографии позволяет выделить раствор только 1-го менее сорбируемого компонента консистенции. В приведенном примере – только Cl- - ионы.

Вытеснительная ионообменная Способы получения хроматограмм хроматография

Обозначенный вид хроматографии имеет сходство как с элюентным, так и с передним способом. Сначала ионит переводят в форму иона, имеющего коэффициент рассредотачивания наименьший по сопоставлению с этим же параметром для хоть какого из ионов разделяемой консистенции. Потом в колонку вводят смесь компонент, которые нужно поделить. Фиксированный объем вводимой пробы Способы получения хроматограмм в данном способе должен быть больше, чем в элюентной хроматографии. Хорошим считается такое содержание компонент, которое отвечает одной десятой обменной емкости ионита, находящегося в колонке.

После ввода пробы через колонку пропускают элюент. В качестве элюента употребляют раствор, в составе которого имеются ионы вытеснителя с бóльшим коэффициентом рассредотачивания, чем Способы получения хроматограмм у хоть какого из ионов пробы. В качестве примера (рис. 11) можно разглядеть разделение ионов Li+ и Na+ (сернокислые соли) с внедрением катионита в Н+ - форме. После того, как содержание ионов Li+ и Na+ в растворе, пропущенном через колонку, составит ~ 20 % обменной емкости ионита, колонку промывают веществом сульфата аммония. Обычно Способы получения хроматограмм, сульфокислотный катионообменник лучше сорбирует ионы Н+, чем Li+. Но, если ионный обмен протекает в присутствии сульфат – ионов происходит воззвание селективности. Ионы Н+ в фазе катионообменника образуют с SO42- - ионами гидросульфат (HSO4-) и равновесие ионного обмена двигается. Потому в рассматриваемой системе ионы Н+ становятся менее сорбируемыми и вытесняются с сорбента ионами Li Способы получения хроматограмм+ и Na+, движущимися по колонке прямо за ионами Li+. Ион NH4+, имеющий больший коэффициент рассредотачивания из всех вышеназванных катионов, перемещается по колонке прямо за ионами Li+ и Na+.

Рис. 3. Выходные кривые при разделении ионов Li+ и Na+ способом вытеснительной хроматографии.

По обозначенным причинам 1-ые порции элюата содержат H2SO Способы получения хроматограмм4, при этом её концентрация равна концентрации подаваемого в колонку раствора (NH4)2SO4. Ионы Na+ и Li+ образуют поначалу смешанную зону, а потом равномерно делятся, так как Li+, имеющий наименьший коэффициент рассредотачивания, движется по колонке резвее, чем ионы Na+.

Таким макаром, после того как ионы Н+ будут вытеснены Способы получения хроматограмм из колонки, в элюате начинают появляться ионы Li+. Можно собрать порции элюата, которые содержат только обозначенные ионы. После вытеснения всех ионов Li+ в элюате появятся ионы Na+. Последними выходят из колонки ионы NH4+. Если объем пробы, введенный в колонку, будет маленьким, ионы NH4+ окажутся в элюате ранее, чем из колонки выйдут ионы Способы получения хроматограмм Li+. В таком случае получить раствор, содержащий только ионы Na+, не представляется вероятным.

Из рассмотренных 3-х видов хроматографии только элюентная хроматография позволяет количественно делить консистенции на составляющие её составляющие. 2-ое преимущество этого метода состоит в том, что при серийных анализах проб не требуется регенерация колонки (сорбент безпрерывно Способы получения хроматограмм регенерируется). В рассмотренном выше примере, анионит после разделения находится в начальной нитратной форме. В колонку вводятся маленькие объемы проб. Во всех фракциях элюата находится сравнимо высочайшее содержание элюента.

Вытеснительная хроматография, единственная из вышеприведенных видов хроматографии, позволяет выделить составляющие консистенции в чистом виде. Потому этот вид хроматографии употребляется, приемущественно Способы получения хроматограмм, для препаративных целей. К недочетам следует отнести необходимость регенерации колонки перед каждым следующим разделением.

Способом передней хроматографии нереально поделить составляющие консистенции, но можно получить в чистом виде один менее сорбируемый компонент.

Таким макаром, для решения аналитических задач употребляется элюентный способ, он имеет последующие достоинства:

– Дает более полное разделение, так как зоны Способы получения хроматограмм сорбатов разбиты зонами элюент.

– Сорбент безпрерывно регенерируется.

– Характеристики удерживания отлично воспроизводимы.



sposobi-vertoletnogo-patrulirovaniya.html
sposobi-videleniya-teksta-mishyu.html
sposobi-vihoda-na-vneshnie-rinki.html